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Efficacité et rentabilité d'une nouvelle méthode de détection des parasites gastro-intestinaux

Il a été démontré que la méthode de l'anse est simple et permet de gagner du temps, comparée aux méthodes de flottation pour la détection des parasites gastro-intestinaux chez le bétail.

Les parasites gastro-intestinaux, y compris les protozoaires et les helminthes, sont couramment détectés chez les animaux et les humains à travers le monde. Ces parasites provoquent principalement des diarrhées, qui peuvent être aqueuses et/ou sanglantes, et dans certains cas, ils peuvent entraîner la mort lorsqu'il y a un grand nombre de parasites ou en cas d'infections par des espèces hautement pathogènes.

Chez le bétail, les infections parasitaires de virulence moyenne ou faible, qui ne présentent pas de symptômes cliniques évidents, peuvent souvent ralentir la croissance des animaux, en particulier des nouveau-nés ou des jeunes animaux ; par conséquent, ces infections ont un impact économique important en affectant la productivité des élevages.

Généralement, après la prolifération asexuée et/ou sexuée des protozoaires, ou la fécondation des helminthes dans les intestins, les formes parasitaires telles que les oocystes, les kystes ou les œufs sont éliminées dans les fèces, marquant la dernière étape avant la prolifération des générations suivantes.

Bien qu'il existe plusieurs méthodes pour détecter ces formes parasitaires finales dans les excréments, la technique de flottation est couramment utilisée pour diagnostiquer les infections. Cette méthode repose sur la séparation des parasites (oocystes, kystes et œufs) des débris fécaux et sur la concentration des organismes à l'aide d'une solution de flottation (par exemple, une solution de saccharose ou de chlorure de sodium saturé), en exploitant les différences de densité spécifique.

Les procédures de flottation varient souvent d'un laboratoire à l'autre et selon les études, les chercheurs adaptant ces méthodes pour les simplifier ou les complexifier selon leurs objectifs.

Une étude internationale a évalué l’efficacité du procédé de flottation en utilisant différentes quantités d’oocystes d’Eimeria tenella et d’œufs d’Heterakis gallinarum comme parasites, avec des solutions de saccharose et de solution saline saturée.

Des solutions fécales parasitaires de dix millilitres contenant les oocystes d’E. tenella ou les œufs d’H. gallinarum ont été utilisées. Après une centrifugation à 1200 × g pendant cinq minutes, le surnageant a été éliminé, puis une solution de saccharose ou saline saturée a été ajoutée jusqu’à un volume final de 10 mL et mélangée complètement. Ensuite, des aliquotes de 400 µL ont été prélevées et les nombres exacts d'oocystes ont été comptés deux fois, en utilisant une chambre de McMaster.
Après la centrifugation, la surface supérieure du tube a été soigneusement recueillie à l'aide d'une anse de prélèvement en fil métallique d'un diamètre de 8 mm. La solution de surface, contenant les oocystes, a été transférée sur une lame de verre et recouverte d'une lamelle. Cette méthode a été baptisée méthode de l’anse.

Efficacité et rentabilité de la méthode de l’anse pour la détection des parasites gastro-intestinaux

Jusqu’à présent, de nombreuses études comparatives ont été menées sur les protocoles de flottation, principalement en évaluant les densités spécifiques, les réactifs utilisés pour les solutions de flottation et une large gamme de protozoaires et d’helminthes. Cependant, bien que la méthode de l’anse ait été introduite dès 1939, elle reste peu utilisée. "Cela pourrait expliquer pourquoi les chercheurs hésitent à adopter cette méthode", souligne l’étude.

Dans cette analyse, les oocystes d’E. tenella et les œufs d’H. gallinarum ont permis de démontrer que la méthode de l’anse est simple et rapide, reposant essentiellement sur trois étapes : dilution des échantillons fécaux, centrifugation avec une solution de flottation et prélèvement des parasites à l’aide de l’anse. "Contrairement à la méthode de flottation traditionnelle, il n'est pas nécessaire d’ajouter une solution de flottation après la centrifugation pour former un ménisque et collecter les organismes flottants à l’aide d’une lamelle", explique l’article. Bien qu'il n'existe pas encore de données comparatives claires entre les méthodes, "la méthode de l’anse pourrait être plus sensible que les méthodes de flottation classiques, en supprimant ces étapes", ajoute-t-il.

Pour le comptage précis des parasites tels que les oocystes et les œufs dans les fèces, des chambres de comptage comme celle de McMaster sont généralement utilisées. "Nous avons pu détecter plus facilement les parasites au microscope et avons constaté que les oocystes et les œufs dans les tubes pouvaient être récupérés dans une proportion d'environ 2,00 à 3,08."

"Nos résultats montrent que la méthode de l’anse est une méthode simple et rentable qui pourrait être un outil alternatif efficace aux techniques de flottation", conclut l'étude.

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